不同宿主来源狂犬病病毒街毒株的增殖特性分析和动物感染特性分析

【摘要】狂犬病是由狂犬病病毒（Rabiesvirus，RABV）感染引起的疾病，能够导致大多数哺乳动物的急性致死性脑脊髓炎。全球每年至少有五万五千人死于狂犬病，中国每年有约有2000人因感染狂犬病病毒死亡。我国的狂犬病病毒传染源主要是犬，每年也有少量家畜和野生动物感染狂犬病死亡。目前，狂犬病尚无有效的治疗方法，接种疫苗是最有效的预防狂犬病的途径。为进一步了解狂犬病病毒生物学特性，本实验对12株狂犬病病毒街毒株的增殖特性进行分析，筛选出6株能够在动物体内外稳定增殖的病毒。根据这6株病毒对动物的致病能力不同，筛选出一株毒力最高的RABV街毒株进行小鼠和犬的感染实验。主要研究内容包括：1．我国狂犬病病毒街毒株的培养和增殖特性比较研究12株我国不同地区来源的狂犬病病毒街毒株在细胞上和乳鼠脑内的增殖特性，分别通过细胞培养和乳鼠颅内接种法进行连续传代，测定病毒不同代次的TCID50。其中6株病毒在经过细胞连续传代培养20代和乳鼠脑内接种传代10代后，病毒滴度稳定升高并趋于稳定，HuNPB3株毒力最高也最稳定，病毒滴度可达105.97TCID50/g和107.97TCID50/mL。另外6株病毒经过三次细胞传代或四次乳鼠脑内传代后TCID50结果为零，不能继续传代。2．狂犬病病毒街毒株小鼠感染实验测定在乳鼠脑内和N2a细胞上生长状态较好的6株病毒的小鼠颅内注射半数感染致死量（LD50）。HuNPB3株滴度最高的，达到106.93LD50/mL。测定HuNPB3株的小鼠后肢肌肉注射LD50，病毒滴度为105.6LD50/mL。选择HuNPB3株为小鼠感染攻击毒株，按10LD50分别颅内和后肢肌肉注射接种，研究HuNPB3街毒株感染小鼠的特性。感染小鼠表现出典型的狂躁型狂犬病临床症状，10LD50颅内接种，第三天能在小鼠大脑内检测到病毒，第六天在小鼠大脑和小脑组织内能检测到病毒，第九天在小鼠的大脑、小脑和脊髓组织中都能检测到RABV。10LD50后肢肌肉接种，第三天能在小鼠脊髓内检测到病毒，第六天能在小鼠的小脑和脊髓中检测到病毒，第九天和第十二天在小鼠的大脑、小脑和脊髓组织中都能检测到RABV。感染RABV的组织没有明显的病理变化。3．狂犬病病毒街毒株HuNPB3犬感染实验以犬为实验动物，按106TCID50的剂量咬肌接种狂犬病病毒，研究HuNPB3街毒株感染犬的特性。感染犬在接种后第7天开始发病，表现出典型的麻痹型狂犬病临床症状，接种后第8天，被感染犬站立不稳，不饮不食，精神抑郁。第10天被感染犬不能抬头，咽喉肌肉收缩，不能发声，舌头肌肉收缩，不再流涎。第11天前肢瘫痪不能站立，第13天四肢瘫痪，第15天死亡。接种后第7-10天，在被感染犬唾液样品中检测到RABV。对发病死亡犬的组织和器官进行检测，在大脑、小脑和脊髓各节段中均检测到RABV，唾液腺和角膜组织内也检测到RABV。内脏器官未检测到狂犬病病毒。各组织器官没有明显病理变化。
【作者】李露；
【导师】夏咸柱；
【作者基本信息】吉林大学，预防兽医学，2014，硕士
【关键词】狂犬病病毒；街毒；增殖特性；动物感染；

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